肖光军，刘艳婷
(遂宁市中心医院 检验科，四川 遂宁 629000)
【摘要】目的：比较3种不同真空采血管采集的血液样本放置不同时间血糖检测结果对妊娠期糖尿病(GDM)诊断的影响。方法：分别使用灰色、红色和绿色真空采血管采集孕24～28周孕妇的空腹血各1管，将其在室温下(18～25 ℃) 放置5 h，每隔1 h使用己糖激酶法(HK法)进行血清(浆)葡萄糖含量测定，观察3种真空采血管葡萄糖检测结果随时间变化的情况及其对GDM诊断结果的影响。结果：灰色、红色和绿色真空采血管各时段的血糖检测结果相互比较均具有显著性差异(P<0.01)；使用灰色真空采血管采集的样本其葡萄糖检测结果受放置时间的影响最低，而红色和绿色管血糖检测结果随样本放置时间的增加而明显降低，且红色管下降速度最快。灰色管各时间段GDM的阳性诊断率最高，绿色管次之，红色管最低；使用灰色管采集的样本在3 h内检测的血糖结果对GDM诊断无影响(P>0.05)；与各时段灰色管GDM诊断阳性率比较，使用红色管采集的样本均具有显著性差异(P<0.01)，而使用绿色管采集的样本在1 h内无显著性差异(P>0.05)。结论：使用灰色真空采血管采集样本各时段的血糖检测结果和GDM阳性诊断率均高于红色和绿色真空采血管，并且最准确、最稳定，受样本放置时间的影响最低。
【关键词】妊娠期糖尿病；血糖检测；真空采血管；样本周转时间；放置时间
妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus，GDM)可增加孕妇的自然流产率，新生儿易发生高胆红素血症、呼吸窘迫综合征、红细胞增多症等。临床上绝大多数GDM的孕妇早期无任何症状和体征，一旦出现症状则对母婴的损害已经形成[1]。《妊娠期糖尿病诊断标准 WS331-2011》于2011年12月1日起实施[2]。在该标准中，可以选择一步法或两步法来诊断妊娠期糖尿病：一步法是在妊娠24～28周直接进行75 g葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test，OGTT)，但因其有需3次采血、长时间不能进食、缴3次血糖检测费用等缺点，无高危因素及经济条件差的孕妇乐意选择两步法；两步法是根据第一步空腹血糖(FPG)结果决定是否进行OGTT检查，其FPG检测结果的准确性直接影响着临床的诊疗工作[1-2]。笔者通过调查我市另外3家医院检验科血糖检测工作，发现导致各实验室血糖检测结果不一致的原因可能是由所使用的样本采集管不同及采样后的样本放置时间不同所引起。本研究使用红色、绿色和灰色3种真空采血管采集孕24～28周孕妇的空腹静脉血各1管，在室温条件( 18～25 ℃)下放置不同时间后比较所得的血糖检测结果，分析其对GDM诊断的影响，现报告如下。
1.1 样本
1.1.1 样本人群 样本人群随机选取在我院门诊孕检室建围生期保健卡的孕24～28周的孕妇，共计59例，年龄19～38岁，平均25岁。
1.1.2 采样前的准备 进行OGTT前1天，晚餐后禁食8～14 h至次日晨(最迟时间不超过上午9时)。实验前连续3 d正常体力活动、正常饮食，即每日进食碳水化合物不少于150 g，检查期间禁食、静坐、禁烟。
1.1.3 样本采集 样本采集时孕妇取坐位，用红色、绿色和灰色真空采血管依次采空腹静脉血各1管，压脉带的扎紧时间不超过1 min。采集后，样本立即轻轻颠倒混匀8次。
1.1.4 样本的处理 样本采集后，立即将红色真空采血管放置于(37±1)℃电热恒温水槽中孵育30 min后取出，4000 r/min离心5 min，然后垂直放置于室温为18～25 ℃的试管架中；将绿色真空采血管和灰色真空采血管立即4000 r/min离心5 min，然后垂直放置于室温为18～25 ℃的试管架中。在室温放置期间，不能打开真空采血管的试管盖。
1.2 试剂
1.2.1 真空采血管 本实验中所使用的红色、绿色和灰色真空采血管均由成都瑞琦科技实业有限责任公司提供，适用地海拔范围为0～725 m。红色真空采血管不含添加剂，绿色真空采血管添加肝素钠抗凝剂，灰色真空采血管添加氟化钠和K2EDTA。
1.2.2 校准品 校准品采用四川迈克提供的生化复合校准品。
1.2.3 质控血清 质控血清采用美国伯乐液体质控，采用水平2和水平3两个水平。
1.2.4 血糖检测试剂 葡萄糖测定试剂由四川迈克提供，测定方法为己糖激酶法。分析参数按试剂盒说明书的要求设置。
1.3 仪器 血糖测定仪器为日本日立7600全自动生化分析仪。
1.4 方法 将处理好的标本，分别在1 h、2 h、3 h、4 h、5 h测定各样本管的血糖值。样本管打开后应在5 min之内完成加样，加样后应立即盖上样本管的盖子并垂直放置于室温为18～25 ℃的试管架中。
1.5 统计学方法 采用SPSS19.0统计学软件进行分析。样本间血糖检测结果的比较采用配对样本t检验，GDM阳性诊断率的比较采用配对四格表资料的χ2检验。
2.1 3种不同真空采血管采样后放置不同时间的血糖检测比较 结果详见表1。
对59例样本连续检测红色、绿色和灰色真空采血管采样后放置1 h、2 h、3 h、4 h、5 h后的血糖结果，并对3种真空采血管1 h血糖结果与2 h、3 h、4 h、5 h血
糖结果进行比较，结果均具有显著性差异(P<0.01)。3种真空采血管不同时间段血糖检测结果相互比较均具有显著性差异(P<0.01)。
表1 3种不同采血管采样后放置不同时间血糖检测比较
注：1)与同种真空采血管1 h时血糖检测结果比较P<0.01； 2)与其他两种真空采血管同时间段比较P<0.01
2.2 3种真空采血管中血糖浓度随样本放置时间的变化 灰色真空采血管血糖值变化不明显；红色和绿色真空采血管血糖浓度均低于灰色管的血糖值，并随放置时间的延长而逐渐减低，红色真空采血管下降速度最快。
2.3 3种不同真空采血管放置不同时间后GDM的阳性诊断率比较 结果详见表2。
表2 3种真空采血管放置不同时间后GDM的阳性诊断率比较(n=59)
注：1)与灰色真空采血管同时间段比较P<0.01；2)与灰色真空采血管1 h比较P<0.05
根据同一患者3种不同真空采血管采集的样本放置1 h、2 h、3 h、4 h、5 h后的血糖检测结果对患者进行诊断，灰色真空采血管各时间段GDM的阳性诊断率最高，绿色管次之，红色管最低；灰色管采集的样本其GDM诊断结果在3 h内无显著性差异(P>0.05)；红色真空采血管各时段GDM诊断阳性率与灰色管比较均具有显著性差异(P<0.01)；而绿色真空采血管各时段GDM诊断阳性率与灰色管比较，在1 h内无显著性差异(P>0.05)。
血糖作为反映糖代谢紊乱的重要指标，其结果准确性直接影响到患者的诊断与治疗。一般对离体血糖进行立即检测才能较准确地反映个体情况。本研究结果显示，使用灰色真空采血管采集样本进行血糖测定的结果更准确、更稳定，受样本放置时间的影响最低；绿色真空采血管和红色真空采血管因不含抗糖酵解剂，使用其采集的样本血糖检测结果随样本放置时间的增加而降低，且红色管下降速度最快。这主要由以下两方面导致：一方面，红色真空采血管血细胞与血清不易分离，为了加速分离血清，血液标本置于(37±1)℃水浴过程中，血细胞(包括红细胞与白细胞)的无氧酵解加快，使样本中葡萄糖迅速降低；绿色真空采血管采集样本后，可立即离心处理，使血细胞与血浆的接触面积减少，导致血细胞无氧酵解作用减弱，从而出现绿色管比红色管的血糖降低速度慢；另一方面，灰色真空采血管添加了氟化钠和K2EDTA，采样后既能抑制糖酵解作用又能立即离心处理分离血浆，从而降低样本采集后放置时间对检测结果的影响。灰色真空采血管放置1 h后检测所得血糖结果均略低于放置2 h、3 h、4 h、5 h所得的血糖结果，这可能是由于真空采血管打开盖子后水分蒸发而血浆浓缩等原因导致[3]，而5 h血糖检测结果又下降，可能是样本放置于室温中，氟化钠抗糖酵解的抑制作用随时间的延长而逐渐降低所致。因此，使用灰色真空采血管进行血糖检测的样本也应尽快完成检测。
在实验室的日常工作中，孕妇检测空腹血糖时经常还有其他生化项目，因氟化钠对许多生化项目的检测结果有影响，为减少采血量经常只使用绿色真空采血管或红色真空采血管采集样本以便同时进行生化检测，再加上从采集到加样检测的周转时间大部分医院需要2～3 h 左右，还可能遇到仪器故障、试管开盖后水分蒸发及细菌污染等因素，直接影响着检测结果的准确性，不能真实反映孕妇体内血糖的水平，导致不同医院GDM诊断结果一致性差[3-4]。因此，为做到血糖检测结果互认，推荐各实验室采用含氟化钠的灰色真空采血管采集样本进行检测，同时各实验室应建立全面的质量管理体系，做好全程质量控制，并充分认识到分析前质量控制的重要性，严格制定和执行血糖检测时样本的采集、运送、预处理以及检测处理程序，以降低各种因素对检测结果的影响，确保检测结果的准确性和可靠性，提高GDM的阳性诊断率。
参考文献：
[1]周畅，王亚南.首次孕检空腹血糖在妊娠期糖尿病诊断中的价值[J].重庆医学，2014，43(36)：4941-4943.
[2]中华人民共和国卫生部.WS 331-2011中华人民共和国卫生行业标准——妊娠期糖尿病诊断[S].北京：中华人民共和国卫生部，2011.
[3]莫巧璇，梁敏华，钟幸容.血糖在3种真空采血管中放置不同时间的稳定性研究[J].检验医学与临床，2014，11(1)：78-80.
[4]王娴默，杨章元，明亮，等.血液标本放置时间对生化指标的影响评价[J].国际检验医学杂志，2015，36(14)：1963-1964.
通信作者：肖光军，373984943@qq.com
【中图分类号】R446.11
【文献标识码】A
DOI：10.11851/j.issn.1673-1557.2017.03.020
优先数字出版地址：http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1688.R.20170412.1642.014.html
(收稿日期：2016-08-10)